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ttxs99木蟲 (小有名氣)
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關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量引物設(shè)計(jì)
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關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量引物設(shè)計(jì)，看有的資料說是要夸內(nèi)含子，那我可不可以直接用CDS呢，或者一個(gè)外顯子比較大，我在這個(gè)外顯子里擴(kuò)呢？ 另外，假如以上都木有好的結(jié)果，可不可以在該基因的3'非翻譯區(qū)設(shè)計(jì)呢，如果不行的話，又是什么原因呢？ 跪求各路大俠幫忙釋疑解難？  |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | 實(shí)時(shí)定量PCR |
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ttxs994樓2013-01-21 15:03:17
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 引物設(shè)計(jì)能跨內(nèi)含子的最好，這樣定量時(shí)以cDNA為模板P出的產(chǎn)物與基因組DNA模板P出的片段不同。真核生物成熟的mRNA包括5’cap-5'UTR-CDS-3'UTR-polyA。所以可以直接從CDS做。從一個(gè)外顯子設(shè)計(jì)引物也是可以的。當(dāng)然也是可以從非翻譯區(qū)設(shè)計(jì)。 |
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2樓2013-01-21 10:12:00
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5樓2013-01-21 19:27:33
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