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半生一夢(mèng)木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
原核表達(dá)跑膠檢測(cè)不到產(chǎn)物
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本人從去年11月份斷斷續(xù)續(xù)做原核表達(dá)至今 一直都沒(méi)有成功表達(dá) 目的基因連接的是pet-28a載體 受體細(xì)胞選擇bl21(de3) 載體和大腸桿菌實(shí)驗(yàn)室的師姐都用來(lái)做過(guò)表達(dá) 是ok的 表達(dá)載體在轉(zhuǎn)到bl21(de3)之前也送去測(cè)序過(guò) 沒(méi)有問(wèn)題 誘導(dǎo)條件也嘗試過(guò)37度3h和20度18h兩種 iptg濃度從0.1mM到1mM也做過(guò)優(yōu)化 來(lái)來(lái)回回page膠跑了也有十幾二十塊了 自己做的膠沒(méi)有跑出來(lái) 拜托師姐做的膠也沒(méi)跑出來(lái) 所以一直很糾結(jié)啊 求高人指點(diǎn)！ |
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cicelyzh
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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3樓2013-05-28 08:30:24
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4樓2013-05-28 11:13:52
半生一夢(mèng)
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5樓2013-05-28 21:12:54
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