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對月流珠新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于PCR,請各位蟲友幫忙
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親愛的蟲友們,我現(xiàn)在在P一個全長基因,我設(shè)計了一個引物,兩端加了酶切位點,前兩次PCR,是出來了條帶的,大小也是對的。自從上上周六那次PCR,相同的體系,相同的條件,就沒有條帶了。開始以為酶失效了,買了新酶,換了新dNTP,沒有條帶;基因組跑了電泳,沒有問題;基因組P這個基因的中間片段,也能出來條帶,可就是P不出全長;重新提了基因組再P,沒有條帶;重新稀釋了引物,木有條帶;重新合成了引物,也沒有條帶;我都懷疑pcr儀壞了,p了一個已知基因,結(jié)果能p出來。我還做了一個退火溫度的梯度PCR,沒有條帶;又做了一個模板濃度梯度PCR,依然沒有條帶,F(xiàn)在是一片茫然啊,求蟲友們指教啊。 不勝感激。 |
木蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
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