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對月流珠新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于PCR，請各位蟲友幫忙
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親愛的蟲友們，我現(xiàn)在在P一個全長基因，我設(shè)計了一個引物，兩端加了酶切位點，前兩次PCR，是出來了條帶的，大小也是對的。自從上上周六那次PCR，相同的體系，相同的條件，就沒有條帶了。開始以為酶失效了，買了新酶，換了新dNTP，沒有條帶；基因組跑了電泳，沒有問題；基因組P這個基因的中間片段，也能出來條帶，可就是P不出全長；重新提了基因組再P，沒有條帶；重新稀釋了引物，木有條帶；重新合成了引物，也沒有條帶；我都懷疑pcr儀壞了，p了一個已知基因，結(jié)果能p出來。我還做了一個退火溫度的梯度PCR，沒有條帶；又做了一個模板濃度梯度PCR，依然沒有條帶。現(xiàn)在是一片茫然啊，求蟲友們指教啊。 不勝感激。 |
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514278815
木蟲 (小有名氣)
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2樓2013-09-02 10:43:09
對月流珠
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3樓2013-09-02 11:22:40
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