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對(duì)月流珠新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于PCR，請(qǐng)各位蟲(chóng)友幫忙
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親愛(ài)的蟲(chóng)友們，我現(xiàn)在在P一個(gè)全長(zhǎng)基因，我設(shè)計(jì)了一個(gè)引物，兩端加了酶切位點(diǎn)，前兩次PCR，是出來(lái)了條帶的，大小也是對(duì)的。自從上上周六那次PCR，相同的體系，相同的條件，就沒(méi)有條帶了。開(kāi)始以為酶失效了，買(mǎi)了新酶，換了新dNTP，沒(méi)有條帶；基因組跑了電泳，沒(méi)有問(wèn)題；基因組P這個(gè)基因的中間片段，也能出來(lái)?xiàng)l帶，可就是P不出全長(zhǎng)；重新提了基因組再P，沒(méi)有條帶；重新稀釋了引物，木有條帶；重新合成了引物，也沒(méi)有條帶；我都懷疑pcr儀壞了，p了一個(gè)已知基因，結(jié)果能p出來(lái)。我還做了一個(gè)退火溫度的梯度PCR，沒(méi)有條帶；又做了一個(gè)模板濃度梯度PCR，依然沒(méi)有條帶�，F(xiàn)在是一片茫然啊，求蟲(chóng)友們指教啊。 不勝感激。 |
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514278815
木蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2013-09-02 10:43:09
對(duì)月流珠
新蟲(chóng) (初入文壇)
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- 金幣: 10.6
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3樓2013-09-02 11:22:40
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