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tankleiming

新蟲 (小有名氣)

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[求助] 熒光定量標(biāo)準(zhǔn)曲線和內(nèi)參的作用

熒光定量標(biāo)準(zhǔn)曲線和內(nèi)參的作用？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？小白 ==

回復(fù)此樓

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之所以深沉

1樓 2013-09-11 14:59:37

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

hl16010921

木蟲 (正式寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

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gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-09-11 19:34:21
tankleiming: 金幣+10, ★★★★★最佳答案 2013-09-16 15:17:46

如果是指realtime PCR的話：1.標(biāo)準(zhǔn)曲線看的是Ct值和模板數(shù)的關(guān)系，二者不全是2的指數(shù)關(guān)系，有時(shí)會(huì)有一定的偏差。因?yàn)槟０宓牧繉CR反應(yīng)是有一定影響的，而且PCR不是完全的2的n次方擴(kuò)增，一般是1.8到2.2之間。
2.內(nèi)參是用來標(biāo)定不同樣品模板量的。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)時(shí)無法保證個(gè)樣品間的取樣量和提取效率一致。
一般熒光定量：1.標(biāo)準(zhǔn)曲線熒光強(qiáng)度和探針載入量的關(guān)系。二者的線性關(guān)系是在一定范圍內(nèi)成立的
2.內(nèi)參，同樣是用來修正不同樣品之間量的差異。

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