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lovehejuhua銀蟲 (小有名氣)
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表達(dá)外源蛋白后測(cè)酶活相關(guān)問題
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1，最近構(gòu)建了一株菌成功表達(dá)了外源蛋白，接下來整細(xì)胞催化測(cè)酶活，初步測(cè)具有活性，能夠催化底物生成產(chǎn)物，但是一直在糾結(jié)怎么計(jì)算酶活單位，我是用 整個(gè)細(xì)胞進(jìn)行催化的，細(xì)胞是離心后沒0.1g用1Ml緩沖液重懸起來，再投入一定濃度的底物進(jìn)行催化，請(qǐng)教各位該怎么計(jì)算酶活？, 2，另外，還有一個(gè)問題，我把重懸的細(xì)胞一直都是在4度保存著，這樣的細(xì)胞還具有催化能力嗎？每次摸索催化條件難道我都要重新培養(yǎng)收集菌體了以后才能進(jìn)行反應(yīng)么？這樣不是很麻煩，有什么方法可以讓細(xì)胞保持一定的活力？以便下次反應(yīng)的時(shí)候可以直接使用上次收集的菌體 |
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3樓2013-10-11 12:20:07
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4樓2013-10-14 15:40:01
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