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963979587銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
實(shí)時(shí)熒光定量pcr,cDNA的加入量會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確度嗎?
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| 大家好,最近一直做熒光定量pcr,20ul體系中3ug的rna反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA,取4ul作為pcr的模板,10ul EvaGreen,4ul引物,2ulRNas水,這個(gè)體系可以得到挺好的結(jié)果,但是溶解曲線(xiàn)的溫度在77°,不知道是不是引物二聚體,而且我覺(jué)得模板的量加的太多了,實(shí)驗(yàn)不能重復(fù),一次就用光了,不知道是不是應(yīng)該稀釋一下? |
QPCR實(shí)驗(yàn)困惑 |

鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
銀蟲(chóng) (初入文壇)
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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