 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 384 | 回復(fù): 0 | |||
[交流]
迷茫迷茫迷茫�。。�！His標(biāo)簽蛋白的固載
|
|
求大俠們幫忙： 最近在表達(dá)一個蛋白，帶了His的tag 純化的時候，使用了Ni-NTA材料，使用500mM咪唑進(jìn)行洗脫 后面的實驗想要把蛋白質(zhì)共價鍵和在材料上面，擔(dān)心咪唑有干擾，想除去咪唑 試驗了超濾的方法，蛋白質(zhì)會沉淀 然后試了透析的方法，使用的是20mM的HEPES-HCL溶液，經(jīng)過一夜的透析之后，蛋白質(zhì)幾乎完全沉淀了，為了彌補這個實驗，就是用100mM TEAB，8M 尿素溶液溶解蛋白，然后加入7倍體積的HEPES溶液稀釋之后，使用CNBr-agarose進(jìn)行固載 固載之后，取上清液和固載錢的蛋白溶液進(jìn)行濃度測定，固載前后的蛋白濃度是0.85和0.15，說明大部分的蛋白質(zhì)都被固載在瓊脂糖上面了 但是，奇怪的現(xiàn)象出現(xiàn)了，在經(jīng)過了洗滌之后，把瓊脂糖溶解在很少量的HEPES溶液里面，然后取一些瓊脂糖加入到考馬斯亮藍(lán)溶液里面，溶液的顏色非常淺，說明蛋白質(zhì)固載的量很少？？？ 我的蛋白質(zhì)到底到哪里去了呢？ 非常感謝！ [ Last edited by 王琦2013 on 2013-11-28 at 16:46 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專碩
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿太原理工安全工程300分，求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
0856求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
11408軟件工程求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿211 初試270分 求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
學(xué)碩274求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
本科雙非材料，跨考一志愿華電085801電氣，283求調(diào)劑，任何專業(yè)都可以
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
找到一些相關(guān)的精華帖子，希望有用哦~
求鈣調(diào)蛋白CLM3用HIS標(biāo)簽的純化protocol
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 帶HIS-tag標(biāo)簽蛋白過NI-NDA掛不上柱子
已經(jīng)有5人回復(fù)
- HIS標(biāo)簽的蛋白不掛柱，求助
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于pET32a的HIS標(biāo)簽
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 請問His-tag（組氨酸標(biāo)簽）怎么加到我的蛋白上去？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- His Tag融合蛋白純化
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 蛋白純化標(biāo)簽有哪些?
已經(jīng)有6人回復(fù)
- His標(biāo)簽的蛋白純化柱子
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 帶HIS標(biāo)簽的可溶蛋白的純化問題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 鎳柱純化帶his標(biāo)簽的蛋白，柱堵了
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 帶GST標(biāo)簽的融合蛋白的純化問題——急急急
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 如何在蛋白純化后去除6組氨酸(6His)標(biāo)簽
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 過帶his標(biāo)簽的蛋白時鎳柱上樣后顏色變棕色是怎么回事
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 已經(jīng)帶his標(biāo)簽?zāi)康牡鞍谆蛉绾卧O(shè)計引物�。康幕蛞呀�(jīng)接在pET-22b的載體上了）
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 想給自己的蛋白加個HIS標(biāo)簽？方法。。。。
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 使用NOVAGEN的His-tag蛋白純化柱出現(xiàn)的問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 目的蛋白加myc或his標(biāo)簽？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- his標(biāo)簽蛋白純化，不掛柱
已經(jīng)有18人回復(fù)
- PET-28a C末端his標(biāo)簽
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】His標(biāo)簽
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 基因帶六個his標(biāo)簽，蛋白純化時為何掛不上鎳柱
已經(jīng)有26人回復(fù)
點擊這里搜索更多相關(guān)資源科研從小木蟲開始，人人為我，我為人人
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 王琦2013 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求調(diào)劑 +7 | 芋泥小鈴鐺 2026-03-28 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +7 | 江辭666 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338 +6 | YYYYYNNNNN 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項目，四級已過 +7 | 幸運哩哩 2026-03-22 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +10 | A-哆啦Z夢 2026-03-23 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +9 | 上岸吧ZJY 2026-03-22 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | lim0922 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +4 | 王了個楠 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 304材料求調(diào)劑
+4
|
鐘llll 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +3 | Amber00 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑一志愿上海交通大學(xué)336分-本科上海211 +4 | 小魚愛有機 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +6 | cccchenso 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +15 | Zhao anqi 2026-03-22 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +5 | WW.' 2026-03-23 | 7/350 |
|