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tmoonday金蟲 (小有名氣)
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[求助]
簡并引物PCR擴(kuò)增問題 已有5人參與
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| 各位蟲友好，敝人這段時(shí)間一直苦于基因克隆問題上，希望高人能夠不吝賜教。請問各位大仙一般用簡并引物擴(kuò)增基因時(shí)的反應(yīng)程序是什么啊，50ul體系各個(gè)成分的量一般怎么組合��？謝謝啦 |
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hellolin
金蟲 (小有名氣)
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4樓2014-02-18 14:03:17
西門吹雪170
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【答案】應(yīng)助回帖
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tmoonday: 金幣+2, ★有幫助, 試試啊 2014-02-18 13:24:56
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10X LA Buffer:5uL dNTP:4uL 上游:2uL 下游:2uL 模板：1uL LA Taq：0.5uL 加水至50uL 1、94℃ 2min 2、94℃ 30sec 3、54℃ 30sec 此溫度根據(jù)自己的引物進(jìn)行調(diào)節(jié) 4、72℃ 2min 延伸時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增的片段大小進(jìn)行調(diào)節(jié) 5、72℃ 10min 2-4共35 cycles |
2樓2014-02-18 13:13:51
forrestgump
新蟲 (著名寫手)
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5樓2014-02-18 14:16:47
鬼羽帝魂
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6樓2014-02-18 16:59:06
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