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zc10917金蟲 (正式寫手)
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昨日第一次跑膠,只做了分離膠,沒弄濃縮膠,師姐表示不知道怎么灌濃縮膠,望給位前輩指導,有視頻啥的最好了。 跑膠的條件是12% page 100v跑了1小時(溴酚藍沒變一條線),然后380v跑到底 不管怎么說跑了一塊膠,用CBB染色,過夜,不過早上有點事中午才來收。估計染了15個小時吧, 是不是太長了,總之結果是感覺膠明顯變小了. 然后脫色,能夠看到有條帶。我加的樣品中只含BSA(分子量66kd),上樣量大概是1微克,蛋白預先在含有DTT的上樣緩沖中95℃反應5分鐘。 條帶有兩個問題:1 條帶位置離上樣口很近 2 條帶不是直線而是折線 今天做的和昨天差不多, 但感覺膠很容易碎 不知道是什么回事 希望各位前輩給予指導 |
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金蟲 (正式寫手)
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