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zc10917金蟲 (正式寫手)
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新手SDS PAGE每日一問 已有2人參與
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昨日第一次跑膠，只做了分離膠，沒弄濃縮膠，師姐表示不知道怎么灌濃縮膠，望給位前輩指導，有視頻啥的最好了。 跑膠的條件是12% page 100v跑了1小時(溴酚藍沒變一條線)，然后380v跑到底 不管怎么說跑了一塊膠，用CBB染色，過夜，不過早上有點事中午才來收。估計染了15個小時吧， 是不是太長了，總之結果是感覺膠明顯變小了. 然后脫色，能夠看到有條帶。我加的樣品中只含BSA(分子量66kd)，上樣量大概是1微克，蛋白預先在含有DTT的上樣緩沖中95℃反應5分鐘。 條帶有兩個問題：1 條帶位置離上樣口很近 2 條帶不是直線而是折線 今天做的和昨天差不多， 但感覺膠很容易碎 不知道是什么回事 希望各位前輩給予指導 |
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zc10917
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