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測轉(zhuǎn)錄組遇到的一個問題 求高手解答 已有1人參與
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最近在華大測了個轉(zhuǎn)錄組,基本所有東西都是分析好的 在看數(shù)據(jù)的時候遇到一個問題: 沒有參考基因組,得到幾萬個unigene,F(xiàn)在用Nr數(shù)據(jù)庫注釋到的基因比如是n個,但是同時用Nr數(shù)據(jù)庫預(yù)測CDS的時候,居然<n,這種情況怎么理解 我想的是基因注釋做blast,unigene和NR庫里的數(shù)據(jù)比對,哪怕不在CDS區(qū)也算是注釋上?可能在非編碼區(qū)比對上了也就算注釋上了。 還有 我得到的cds序列不是從起始密碼子開始,是不是轉(zhuǎn)錄組CDS預(yù)測不一定得到完整的cds 因為涉及到數(shù)據(jù)注釋的一些問題了,也不太了解,求高手解答 |
金蟲 (小有名氣)
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第一,ncbi nr數(shù)據(jù)庫不是萬能的,很多基因,尤其是近年來高通量測序得到的基因并不包含在該數(shù)據(jù)庫中。 第二,unigene是用轉(zhuǎn)錄組測序的結(jié)果直接拼接然后去冗余得到的,在進行注釋的時候,不僅僅是參考nr數(shù)據(jù)庫。在數(shù)據(jù)庫中沒有同源序列,但有RNA-Seq數(shù)據(jù)支持的也算unigene,注釋可能就是unknown protein. 第三,RNA-Seq是要把cDNA打斷后建立短片段測序文庫,因此不一定能拼接出完整的轉(zhuǎn)錄本。另一方面,真實的cDNA也是有UTR的,不是從ATG開始。 |
金蟲 (小有名氣)
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