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質(zhì)粒是PCR產(chǎn)物,片段是磷酸化的,易自連,求連接體系中二者的比例,希望高手指點(diǎn) 已有5人參與
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| 大家好,最近做連接轉(zhuǎn)化,我想請教大家一個問題,我現(xiàn)在的質(zhì)粒是1700 bp,自己構(gòu)建的,PCR產(chǎn)物,兩端都是-OH,不會自連;而插入的片段是大小不等的片段,大小在200-2000 bp,現(xiàn)在準(zhǔn)備做連接,基于質(zhì)粒不會自連,片段易自連,而且大小差距不大,我打算將載體濃度提高,為載體:目的片段=5:1和10:1,主要是想把載體質(zhì)粒連接上去,不然全是片段的自連,不知道可行不?謝謝前輩指點(diǎn) |


銀蟲 (小有名氣)

至尊木蟲 (文壇精英)




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