 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2684 | 回復: 10 | ||
[求助]
質(zhì)粒是PCR產(chǎn)物，片段是磷酸化的，易自連，求連接體系中二者的比例，希望高手指點 已有5人參與
|
||
| 大家好，最近做連接轉化，我想請教大家一個問題，我現(xiàn)在的質(zhì)粒是1700 bp,自己構建的，PCR產(chǎn)物，兩端都是-OH，不會自連；而插入的片段是大小不等的片段，大小在200-2000 bp，現(xiàn)在準備做連接，基于質(zhì)粒不會自連，片段易自連，而且大小差距不大，我打算將載體濃度提高，為載體：目的片段=5:1和10:1，主要是想把載體質(zhì)粒連接上去，不然全是片段的自連，不知道可行不？謝謝前輩指點 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有120人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 重組質(zhì)粒構建 連接轉化效率低 求幫助啊
已經(jīng)有19人回復
- 眼含熱淚求助：pcDNA3.1 插入4000bp 質(zhì)粒構建，大蝦請留步
已經(jīng)有6人回復
- 載體去磷酸化后的回收問題
已經(jīng)有21人回復
- 連接不成功，跪求指導！
已經(jīng)有26人回復
- Sac1和Xho1的雙酶切連接
已經(jīng)有5人回復
- 關于使載體平末端環(huán)化的問題
已經(jīng)有14人回復
- 急求:PCR 產(chǎn)物連接轉化 涂板后就是不長 到底是怎么回事啊
已經(jīng)有5人回復
- 2.7Kb的片段連接問題
已經(jīng)有6人回復
- 求助--雙酶切連接構質(zhì)粒
已經(jīng)有15人回復
- 質(zhì)粒與片段的連接
已經(jīng)有9人回復
- 有沒有用過XmnI這個酶的?酶切后連接需要注意什么問題么？
已經(jīng)有12人回復
- 平末端連接不上，求助
已經(jīng)有21人回復
- 單酶切的大片段連接轉化及多個片段的連接轉化問題
已經(jīng)有8人回復
- 雙酶切之后，線狀質(zhì)粒的連接問題
已經(jīng)有13人回復
- 關于基因重組過程中的去磷酸化和連接
已經(jīng)有4人回復
- 酶切酶連轉化后單克隆檢測不對
已經(jīng)有8人回復
- 無模板pcr合成短片段 一直失敗
已經(jīng)有44人回復
- 虛心請教關于平—粘末端的連接問題
已經(jīng)有18人回復
- PCR ， 雙酶切，連接問題
已經(jīng)有17人回復
- 在基因重組過程中，怎樣鑒別質(zhì)粒載體是否被限制性內(nèi)切酶切好？
已經(jīng)有10人回復
- 【求助/交流】關于重組質(zhì)粒的構建，總是失敗，希望高手指點一下啊～～
已經(jīng)有16人回復
- 【求助/交流】連接產(chǎn)物轉化后菌落PCR正確，提取的質(zhì)粒卻比空質(zhì)粒還小？
已經(jīng)有4人回復
- 【求助/交流】關于酶切產(chǎn)物連接的一點問題
已經(jīng)有13人回復
- 【求助/交流】長片段的連接轉化
已經(jīng)有9人回復
5樓2014-06-04 14:11:31
杰-米尼
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1369.3
- 散金: 10
- 帖子: 153
- 在線: 40.7小時
- 蟲號: 2018602
- 注冊: 2012-09-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物生理與生化
6樓2014-06-04 16:17:47
8樓2014-06-05 05:38:03
9樓2014-06-06 17:40:15
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- MolEPI: 1
- 應助: 908 (博后)
- 金幣: 17148.7
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14518
- 在線: 2183.8小時
- 蟲號: 514340
- 注冊: 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學
10樓2014-06-09 09:28:59
2樓2014-06-03 17:53:45
3樓2014-06-03 18:28:15
4樓2014-06-03 18:28:37
7樓2014-06-04 20:29:25
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 liuyil 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +9 | zjl的號 2026-03-16 | 14/700 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +5 | 搗蛋豬豬 2026-03-11 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 機械專碩調(diào)劑
+3
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(華東)305分求調(diào)劑 +3 | 嘉年新程 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +3 | 5201314Lsy！ 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 學碩285求調(diào)劑 +13 | Wisjxn 2026-03-12 | 46/2300 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | ?醬給調(diào)劑跪了 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑（材料與化工327） +4 | 愛吃香菜啦 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工301求調(diào)劑 +5 | 奕束光 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 工科，求調(diào)劑 +3 | 我887 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿211化學學碩310分求調(diào)劑 +8 | 努力奮斗112 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 309分請求調(diào)劑 +7 | dtdxzxx 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程與技術考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 福州大學楊黃浩課題組招收2026年專業(yè)學位博士研究生，2026.03.20截止 +3 | Xiangyu_ou 2026-03-12 | 3/150 |
|