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[求助]
質(zhì)粒是PCR產(chǎn)物，片段是磷酸化的，易自連，求連接體系中二者的比例，希望高手指點(diǎn) 已有5人參與
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| 大家好，最近做連接轉(zhuǎn)化，我想請(qǐng)教大家一個(gè)問題，我現(xiàn)在的質(zhì)粒是1700 bp,自己構(gòu)建的，PCR產(chǎn)物，兩端都是-OH，不會(huì)自連；而插入的片段是大小不等的片段，大小在200-2000 bp，現(xiàn)在準(zhǔn)備做連接，基于質(zhì)粒不會(huì)自連，片段易自連，而且大小差距不大，我打算將載體濃度提高，為載體：目的片段=5:1和10:1，主要是想把載體質(zhì)粒連接上去，不然全是片段的自連，不知道可行不？謝謝前輩指點(diǎn) |
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9樓2014-06-06 17:40:15
2樓2014-06-03 17:53:45
3樓2014-06-03 18:28:15
4樓2014-06-03 18:28:37
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