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pgex 4t-1載體 無須誘導 已有1人參與
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1、我想從產(chǎn)朊假絲酵母菌中擴增出尿酸酶的基因 但是查genenbank中沒有產(chǎn)朊假絲酵母菌來源的尿酸酶mRNA只有DNA 看一些文獻設計的引物是按照DNA設計的 是不是在做PCR的過程中省去逆轉錄的步驟 直接擴增呢 2、設計引物時目的基因的5'端都是以ATG開頭的 在目的基因的兩端加入酶切位點是在設計好的引物基礎上加4-6堿基作為酶切位點還是在5'端改幾個堿基使之成為酶切位點？ 3、兩個目的基因連接 之間要加入一個酶切位點 我知道不能加目的基因、載體中存在的 但是不存在的酶切位點還有很多 我該怎么選擇？ 4、將PGEX 4T-1改造成無需誘導即可表達目的基因的載體 是刪除其中的lacIq嗎？如何刪除？刪除后如何將載體重新連接起來呢？ 求大神指導 |
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3樓2014-07-17 18:14:21
gyesang
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4樓2014-07-18 15:17:04
5樓2014-07-19 10:00:20
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