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[交流]
小片段DNA雙鏈 PCR合成 已有7人參與
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各位大神大家好，我最近在構(gòu)建一個(gè)含有隨機(jī)片段的DNA文庫， 設(shè)計(jì)了一個(gè)GGCTAGTCGTACGATNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNCTGCATCTGCT的模板連， 和一小段引物CCGATCAGCATGCT，使用PCR擴(kuò)增形成雙鏈，我的條件是這樣的 體系：模板5ug 引物15ug taq酶1ul dNTP 2ul 10x buffer，2ul 總體系100ul 反應(yīng)條件：95℃、5min，50℃、5min，72℃10min， 結(jié)果感覺合成的雙鏈較少（電泳結(jié)果單練多，雙鏈少），回收達(dá)不到要求。而且電洗脫感覺效果也不行 請大家支支招 |
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2樓2015-04-21 10:28:16
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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3樓2015-04-21 21:12:25
Sunshine092
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4樓2015-04-22 10:07:03
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