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小鼴鼠木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
為什么兩次PCR做的結(jié)果不一致？ 已有3人參與
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| 篩雙交換的，第一遍PCR有條帶，第二遍PCR重復(fù)，結(jié)果就沒(méi)有條帶了。這是什么原因呢？我肯定沒(méi)加錯(cuò)樣。。太坑了…… |
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啟從QICONG
新蟲(chóng) (初入文壇)
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9樓2015-09-01 09:03:54
2樓2015-08-07 08:23:14
18761615793
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
小蟲(chóng)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 淡定淡定，正常，二次PCR本身錯(cuò)配就較高，因此總是會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，只能想辦法提高擴(kuò)增的特異性了，可以看看這篇文章（http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html）此外注意上樣量，二次擴(kuò)增模板要稀釋1000倍左右也很重要，好運(yùn)嘍~ |
3樓2015-08-07 09:43:10
小鼴鼠
木蟲(chóng) (小有名氣)
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4樓2015-08-10 19:25:53
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