 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 6192 | 回復(fù): 34 | ||
[求助]
雙酶切為什么會切出來這么多條帶？ 已有3人參與
|
||
|
我是對質(zhì)粒進行雙酶切，用的是BamH I 和EcoR V這兩個酶，采用20微升酶切體系。Marker 是15000的，四個樣的雙酶切目的條帶在1650bp左右的位置，最右側(cè)的一個是對照，對照質(zhì)粒酶切下來的條帶是400bp左右。為什么我得到的重組質(zhì)粒雙酶切會出現(xiàn)這么多條帶的情況？該如何避免？單酶切一切正常。第二個圖是單酶切。 雙酶切1o 2016-03-10 21 時 05 分.jpg EcoRV單酶切條帶 5號112016-03-10 18 時 46 分.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有204人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請問為什么測序?qū)α说闹亟M質(zhì)粒，雙酶能切出其他條帶
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 關(guān)于構(gòu)建pET28a載體轉(zhuǎn)化后IPTG誘導(dǎo)跑SDS-PAGE膠問題。
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 求分析瓊脂糖凝膠電泳圖
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 生工測序重疊峰交流
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 雙酶切切出來三條帶
已經(jīng)有31人回復(fù)
- 質(zhì)粒電泳問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 雙酶切后載體片段變小
已經(jīng)有8人回復(fù)
- （侯氏出品）雙酶切連接反應(yīng)之全攻略
已經(jīng)有89人回復(fù)
- 關(guān)于酶切位點的問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 原核表達系統(tǒng)中提取質(zhì)粒無超螺旋，什么情況，求解
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 【求助】AFLP選擴片段太大，酶切不徹底
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 關(guān)于酶切驗證克隆的一點點小疑問！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】pcr、酶切問題，急！
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 【分享】質(zhì)粒提取原理（轉(zhuǎn)）
已經(jīng)有13人回復(fù)
陳碩5樓2016-03-11 08:56:51
|
我們實驗室自己重建的質(zhì)粒。感覺我后期再加工加工可以做marker當(dāng)商品賣了，到時候給你五折優(yōu)惠，哈哈。我也不知道為啥，出發(fā)質(zhì)粒好好的，要說雙酶切咋會這么多長度區(qū)間都有條帶呢？想不通，找不到原因。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2016-03-11 17:56:28
尋塔dadada
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1209.3
- 紅花: 2
- 帖子: 12
- 在線: 10.6小時
- 蟲號: 2430815
- 注冊: 2013-04-22
- 專業(yè): 生物化學(xué)
|
會不會和你抽的質(zhì)粒有關(guān)系啊，我們實驗室之前就有同學(xué)抽質(zhì)粒出現(xiàn)問題，雙酶切時就出現(xiàn)好幾條雜條帶。后來重新抽了質(zhì)粒再去雙酶切就好了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
14樓2016-03-12 00:22:54
gmingwei102
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 119
- 紅花: 1
- 帖子: 7
- 在線: 2.8小時
- 蟲號: 3932634
- 注冊: 2015-06-19
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
|
如果擔(dān)心你的酶切位點有問題，你可以在質(zhì)粒那個酶切位點設(shè)計一個引物，將質(zhì)粒拿去用引物測個序，就知道位點有沒有問題了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
17樓2016-03-12 15:31:31
18樓2016-03-13 11:17:25
2樓2016-03-10 22:06:17
3樓2016-03-10 22:28:27
wang2568
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
- 金幣: 293.8
- 帖子: 76
- 在線: 55.8小時
- 蟲號: 2134701
- 注冊: 2012-11-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤研究體系新技術(shù)
4樓2016-03-11 08:44:35
ken19860823
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 3574.2
- 紅花: 9
- 帖子: 875
- 在線: 107.4小時
- 蟲號: 3150033
- 注冊: 2014-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
6樓2016-03-11 09:28:57
|
也是用這兩個酶。好糾結(jié)啊，BamH I之前酶切不成功，感覺像是這個酶切位點出了問題。讓我不明白的是就算那個位點出問題，那該怎么解釋雙酶切時出來這么多條帶。這兩天快被整瘋了，想不明白。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2016-03-11 14:53:17
8樓2016-03-11 14:54:28
ken19860823
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 3574.2
- 紅花: 9
- 帖子: 875
- 在線: 107.4小時
- 蟲號: 3150033
- 注冊: 2014-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
9樓2016-03-11 15:45:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 陳碩 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 食品專碩 一志愿雙一流 328 +3 | xiaom99 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 林之夕 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +5 | 超級伊昂大王 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +5 | kotoko_ik 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +7 | vv迷 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +7 | 你好明天你好 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 350求調(diào)劑 +6 | weudhdk 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！
+4
|
酥酥魚.. 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 懷瑾握瑜l 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計算機技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 086500 325 求調(diào)劑 +3 | 領(lǐng)帶小熊 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿福大288有機化學(xué)，求調(diào)劑 +3 | 小木蟲200408204 2026-03-18 | 3/150 |
|