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陳碩

銅蟲 (正式寫手)

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[求助] 雙酶切為什么會(huì)切出來(lái)這么多條帶？已有3人參與

我是對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，用的是BamH I 和EcoR V這兩個(gè)酶，采用20微升酶切體系。Marker 是15000的，四個(gè)樣的雙酶切目的條帶在1650bp左右的位置，最右側(cè)的一個(gè)是對(duì)照，對(duì)照質(zhì)粒酶切下來(lái)的條帶是400bp左右。為什么我得到的重組質(zhì)粒雙酶切會(huì)出現(xiàn)這么多條帶的情況？該如何避免？單酶切一切正常。第二個(gè)圖是單酶切。

雙酶切1o 2016-03-10 21 時(shí) 05 分.jpg

EcoRV單酶切條帶 5號(hào)112016-03-10 18 時(shí) 46 分.jpg

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1樓 2016-03-10 21:36:39

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陳碩

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引用回帖:

5樓: Originally posted by anjingde at 2016-03-11 08:56:51
BamH I 和EcoR V這兩個(gè)酶的單酶切都是要做的，如果兩個(gè)結(jié)果相差很大，可能是載體或者重組的基因里有其中一個(gè)酶的酶切位點(diǎn)

我今天再做一遍BamH I 的單酶切看看。

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8樓2016-03-11 14:54:28

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陳碩

2樓2016-03-10 22:06:17

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還有相同的酶切位點(diǎn)

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陳碩

怒放的生命

3樓2016-03-10 22:28:27

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★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
陳碩: 金幣+5 2016-03-14 10:33:50

切成marker了，啥質(zhì)粒這么牛!

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4樓2016-03-11 08:44:35

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