 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3649 | 回復(fù): 21 | ||
[求助]
基因構(gòu)建到表達(dá)載體上一直檢測不到過表達(dá) 已有4人參與
|
||
| 今年上半年購買了一個基因的克隆載體，然后交給外包公司，讓他們把CDS序列連接到表達(dá)載體上面，目的基因N端加了一小段柔性肽和HA標(biāo)簽，后面通過包裝慢病毒感染細(xì)胞，一直不能檢測到HA，換了蛋白本身的的抗體也檢測不到蛋白，細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外都沒有，想請問一下這個過表達(dá)體系是不是哪里缺少東西出了問題？ 之后老師建議把克隆載體直接轉(zhuǎn)染到細(xì)胞當(dāng)中，這樣能表達(dá)蛋白么，還是應(yīng)該把構(gòu)建好的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞當(dāng)中？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有193人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 有關(guān)pPICZA、pPIC9K酵母表達(dá)質(zhì)粒如何正確構(gòu)建載體表達(dá)蛋白
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 報告基因的載體的構(gòu)建
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 原核表達(dá)始終構(gòu)建載體不成功�。。�！
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 如何加上酶切位點和保護(hù)堿基構(gòu)建目的基因的表達(dá)載體？
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 關(guān)于構(gòu)建基因表達(dá)載體，以及基因開放閱讀框
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 表達(dá)載體構(gòu)建問題
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 構(gòu)建表達(dá)載體后要么檢測不到目的基因，要么檢測不到載體上的抗性基因
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 構(gòu)建植物表達(dá)載體，GUS或GFP對目的基因的功能是否有影響？
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 表達(dá)載體轉(zhuǎn)農(nóng)桿菌后的基因丟失問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 將啟動子構(gòu)建到1304載體上，不知道怎么構(gòu)，求助！
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 原核表達(dá)載體構(gòu)建- 遇到的一些問題···
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 表達(dá)載體構(gòu)建的若干問題，謝謝大家。
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【緊急！】真核表達(dá)載體構(gòu)建知識請教
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 如果一個外源基因?qū)?xì)菌有毒性，如何構(gòu)建過表達(dá)載體/回補(bǔ)載體
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 表達(dá)載體的構(gòu)建
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建問題~請指教
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 將eGFP構(gòu)建到病毒表達(dá)載體后，竟然檢測不到eGFP的表達(dá)...why？？ 請高人指點
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 小片段基因文庫構(gòu)建中載體的選擇
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 擬南芥轉(zhuǎn)入過表達(dá)載體，基因表達(dá)量下降
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 外泌型融合蛋白表達(dá)載體構(gòu)建
已經(jīng)有1人回復(fù)
4樓2016-10-09 12:53:44
kangaroo0513
新蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 154 (高中生)
- 金幣: 2277.4
- 散金: 100
- 紅花: 29
- 帖子: 464
- 在線: 119.4小時
- 蟲號: 2621902
- 注冊: 2013-08-28
- 專業(yè): 細(xì)胞物質(zhì)運(yùn)輸
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-10-09 22:33:16
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2016-10-10 10:00:10
王旭昉: 金幣+15, ★★★很有幫助 2016-10-13 10:11:36
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-10-09 22:33:16
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2016-10-10 10:00:10
王旭昉: 金幣+15, ★★★很有幫助 2016-10-13 10:11:36
|
先順轉(zhuǎn)293系列細(xì)胞，然后做WB，看看是不是有表達(dá)。如果有表達(dá)，再考慮是不是病毒質(zhì)粒的問題。我做病毒做的很多，so，可以站短我你的q，交流詳細(xì)問題比較方便。 |
6樓2016-10-09 18:57:14
匿名
用戶注銷 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 85 (初中生)
- 金幣: 1294.2
- 散金: 30
- 紅花: 7
- 帖子: 1933
- 在線: 149.4小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2013-10-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
9樓2016-10-09 22:41:15
2樓2016-10-08 15:59:26
肖穎2009
鐵蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 36 (小學(xué)生)
- 金幣: 1068.4
- 散金: 35
- 紅花: 8
- 帖子: 665
- 在線: 147.7小時
- 蟲號: 945732
- 注冊: 2010-01-20
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
3樓2016-10-09 10:28:19
肖穎2009
鐵蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 36 (小學(xué)生)
- 金幣: 1068.4
- 散金: 35
- 紅花: 8
- 帖子: 665
- 在線: 147.7小時
- 蟲號: 945732
- 注冊: 2010-01-20
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
5樓2016-10-09 15:40:49
7樓2016-10-09 19:18:48
匿名
用戶注銷 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 85 (初中生)
- 金幣: 1294.2
- 散金: 30
- 紅花: 7
- 帖子: 1933
- 在線: 149.4小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2013-10-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-10 10:00:24
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2016-10-10 10:00:32
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-10 10:00:24
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2016-10-10 10:00:32
 本帖僅樓主可見 |
8樓2016-10-09 22:39:46
肖穎2009
鐵蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 36 (小學(xué)生)
- 金幣: 1068.4
- 散金: 35
- 紅花: 8
- 帖子: 665
- 在線: 147.7小時
- 蟲號: 945732
- 注冊: 2010-01-20
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
10樓2016-10-10 09:10:44
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 a00wd00 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | www_q 2026-03-18 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +4 | ^O^乜 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +4 | 申子申申 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)，327分，材料與化工085600 +5 | Ncdx123456 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 320求調(diào)劑0856
+3
|
不想起名字112 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿天大材料與化工（085600）總分338 +5 | 蔡大美女 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +4 | 冬十三 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5 | 想上岸的鯉魚 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 文思客 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(xué)(華東)305分求調(diào)劑 +3 | 嘉年新程 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學(xué)一志愿川大藥學(xué)327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
|