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基因構建到表達載體上一直檢測不到過表達 已有4人參與
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| 今年上半年購買了一個基因的克隆載體,然后交給外包公司,讓他們把CDS序列連接到表達載體上面,目的基因N端加了一小段柔性肽和HA標簽,后面通過包裝慢病毒感染細胞,一直不能檢測到HA,換了蛋白本身的的抗體也檢測不到蛋白,細胞內和細胞外都沒有,想請問一下這個過表達體系是不是哪里缺少東西出了問題? 之后老師建議把克隆載體直接轉染到細胞當中,這樣能表達蛋白么,還是應該把構建好的表達載體轉染到細胞當中? |


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