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[求助]
急!求助!設(shè)計pcr含兩個簡并堿基,測序要增加內(nèi)引物!不太懂,哪位高手指點下!
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求助:參照別人的文獻(xiàn)設(shè)計pcr含兩個簡并堿基!條帶已擴(kuò)增出來,下面要測序,文獻(xiàn)中說測序除本身pcr引物外要增加內(nèi)引物,里面包含四條引物,在測序的時候是將其中的一對,還是加520F、624F和682R或813R中的三條。昨天給測序公司發(fā)了封咨詢的郵件,回復(fù)說一次測序只能加一條引物。小弟是新手,望高人給下指點,不勝感激! Purified fragments were directly sequenced with the BigDye Terminator Cycle Sequencing kit (Applied Biosystems, Foster, CA,USA) using the same primers as for PCR plus additional internal sequencing primers 520F (50-GAAYAAGTAT GGTCGTCC), 624F (50-CAGCCATTTATGCGTTGGA-30), 682R (50-CTCCARCGCATAGGCTG) or 813R(50-GTGAATCCTCCWGTTAAGTA-30) and finally analyzedon the ABI PRISM377 DNA Sequencer. |
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