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半生一夢木蟲 (小有名氣)
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[求助]
原核表達跑膠檢測不到產(chǎn)物
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本人從去年11月份斷斷續(xù)續(xù)做原核表達至今 一直都沒有成功表達 目的基因連接的是pet-28a載體 受體細胞選擇bl21(de3) 載體和大腸桿菌實驗室的師姐都用來做過表達 是ok的 表達載體在轉(zhuǎn)到bl21(de3)之前也送去測序過 沒有問題 誘導(dǎo)條件也嘗試過37度3h和20度18h兩種 iptg濃度從0.1mM到1mM也做過優(yōu)化 來來回回page膠跑了也有十幾二十塊了 自己做的膠沒有跑出來 拜托師姐做的膠也沒跑出來 所以一直很糾結(jié)啊 求高人指點！ |
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wodezxn
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9樓2013-05-30 08:04:51
wodezxn
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4樓2013-05-28 11:13:52
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