 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3399 | 回復(fù): 12 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
574759350鐵蟲 (小有名氣)
|
[求助]
怎樣將兩個基因共表達(dá)？
|
|||
| 大家好，怎樣將兩個基因插入一個表達(dá)載體中讓其反向表達(dá)，并且在載體上另插入一個相同的啟動子，大家有沒有做過的？能不能說一下大概的思路，謝謝！ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸生物學(xué)實驗經(jīng)驗 | 生物化學(xué)和分子生物學(xué) |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有248人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 基因全長及表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 將兩個基因串聯(lián)到啟動子下面，兩個基因都能表達(dá)么？
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 多個基因共表達(dá)純化問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 基因過表達(dá)中目的片段問題？？？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 如何查找一個基因的差異表達(dá)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 同時表達(dá)兩種蛋白表達(dá)問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 兩個基因融合構(gòu)建真核表達(dá)載體需要去掉信號肽嗎?
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，質(zhì)粒的設(shè)計
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 基因表達(dá)分析怎樣做
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 兩個基因融合不起來
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 求助：關(guān)于基因表達(dá)中調(diào)控蛋白和轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白的連接和表達(dá)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 酶基因表達(dá)量高，酶活性就一定高嗎？（請大家?guī)蛶兔Γx謝）
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】請教達(dá)人：想找出兩個細(xì)菌中差異表達(dá)的基因，有什么成熟且便宜的方法？
已經(jīng)有31人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因連接表達(dá)載體后涂板不長菌
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 引物設(shè)計求助~
已經(jīng)有13人回復(fù)
574759350
鐵蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 183
- 帖子: 100
- 在線: 22.4小時
- 蟲號: 646680
- 注冊: 2008-11-05
- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
送紅花一朵 
9樓2013-07-07 09:24:56
gyesang
榮譽版主 (著名寫手)
-
專家經(jīng)驗: +24 - MolEPI: 31
- 應(yīng)助: 599 (博士)
- 貴賓: 2.689
- 金幣: 24334.9
- 散金: 1088
- 紅花: 88
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 2327
- 在線: 623.1小時
- 蟲號: 849017
- 注冊: 2009-09-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
- 管轄: 分子生物
2樓2013-07-06 19:18:56
酶切專家
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 96 (初中生)
- 金幣: 1610.8
- 紅花: 4
- 帖子: 149
- 在線: 41.3小時
- 蟲號: 1648414
- 注冊: 2012-02-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 其實這種表達(dá)要分原核還是真核表達(dá)，真核有IRES，2A連接子等，原核表達(dá)可以借鑒pDual系列的載體設(shè)計 2013-07-06 23:04:43
574759350: 金幣+5, ★有幫助 2013-07-07 09:14:01
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 其實這種表達(dá)要分原核還是真核表達(dá)，真核有IRES，2A連接子等，原核表達(dá)可以借鑒pDual系列的載體設(shè)計 2013-07-06 23:04:43
574759350: 金幣+5, ★有幫助 2013-07-07 09:14:01
|
理論上是可行的。常見的比較典型的例子是在同一個載體上表達(dá)抗體的重鏈和輕鏈基因。如質(zhì)粒pComb3 （原文章：A vector for the expression of recombinant monoclonal Fab fragments in bacteria）。 但你要求兩個基因反向表達(dá)，有什么特殊原因嗎？ 一般來說，如果是兩個獨立表達(dá)的調(diào)控單元，基因的方向的影響不太大。 關(guān)鍵是載體的整體設(shè)計，做一個切實可行的克隆方案，保證計劃的實現(xiàn)。 建議你找一個有較好分子生物學(xué)功底的同學(xué)幫忙設(shè)計。 祝好運！ |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
3樓2013-07-06 22:35:48
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！IRES后面的蛋白的翻譯效率有時候不是太高，這也是個問題 2013-07-06 23:05:48
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！IRES后面的蛋白的翻譯效率有時候不是太高，這也是個問題 2013-07-06 23:05:48
| 若欲表達(dá)兩個融合的不同的基因，而且由同一個啟動子進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，制造出的mRNA會含有兩個基因的序列，當(dāng)翻譯第一個基因而碰到終止密碼子時，核糖體會從mRNA上掉下來，造成第二個基因無法表達(dá)。解決這個問題的方法是，在兩個基因間加入一個內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(internal ribosome entry site,IRES)序列，讓第二個基因可由內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(internal ribosome entry site,IRES)序列處進(jìn)行翻譯，如此兩個基因就可以同時被翻譯，制造出不同的蛋白質(zhì)。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
4樓2013-07-06 22:57:45
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +5 | 曼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +13 | 用戶573181 2026-03-20 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | wcq131415 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +4 | 1124361 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | HanBeiNingZC 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +18 | chaojifeixia 2026-03-19 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +5 | kotoko_ik 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +3 | desto 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +5 | prayer13 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +5 | 孅華 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南化學(xué)（0703）總分337求調(diào)劑 +9 | niko- 2026-03-19 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 妮妮ninicgb 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +5 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計算機技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|