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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 原核表達誘導蛋白
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[求助]
原核表達誘導蛋白
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| 請問大家原核表達誘導蛋白時用的IPTG濃度是多少？，跑SDS-PAGE電泳的時候，菌體破碎后上清跟菌體分開分別上樣嗎？謝謝 |
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5樓2013-07-25 10:35:24
alicelchf
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應助回帖
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37度 3-4小時誘導，可以1mM，這樣表達會快點，但是前提是你的蛋白不是說很么特殊的蛋白 16度過夜的話，一般都是0.5mM以下了，因為要溫和誘導。 iptg過量會影響你的蛋白表達，有時候還會抑制，所以要慎用！ 跑SDS-PAGE電泳的時候，菌體破碎后上清跟菌體分開分別上樣，因為這是判斷你的蛋白是否可溶的標準，所以需要的。 |
2樓2013-07-24 11:59:27
3樓2013-07-24 14:53:08
4樓2013-07-24 16:29:44
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