 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸雜交 » 目的片段和載體連接一直不上
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4956 | 回復: 24 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
目的片段和載體連接一直不上 已有7人參與
|
||
|
1、目的片段738bp（兩端帶酶切位點）,載體選擇pCAMBIA3301,酶切位點選擇Nco I和BstE II。載體確定已經(jīng)雙酶切開來，目的片段應該也雙酶切成功（電泳圖片看不出來）。用的Promega的T4連接酶，載體和目的片段摩爾比1:5，反應體系20ul，22℃連接3.5小時，轉(zhuǎn)化至DH5α，未出現(xiàn)菌落。 2、也有說將目的片段和T載體先連接，然后再和表達載體連接，這樣更容易連上。原理是什么，不懂。 感謝您的幫助。 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有226人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 【酶連】三片段連接總是做不出來，求助！
已經(jīng)有7人回復
- 載體與片段連不上
已經(jīng)有13人回復
- 目的基因與載體連接問題
已經(jīng)有8人回復
- T載體連接不上去
已經(jīng)有26人回復
- 片段總是連不到T載體上
已經(jīng)有22人回復
- DNA片段連接到載體上都有什么方法
已經(jīng)有6人回復
- 目的片段和T載體連接后PCR條帶詭異
已經(jīng)有16人回復
- 確定連接時載體，片段的加入量
已經(jīng)有4人回復
- 全式金的pEASY-EI載體和目的基因連不上
已經(jīng)有10人回復
- PCR片段與載體連接不上
已經(jīng)有6人回復
- 長片段連接問題
已經(jīng)有12人回復
- 目的片段與載體連接后無法檢測出
已經(jīng)有7人回復
- 關于連接轉(zhuǎn)化載體和片段的問題
已經(jīng)有6人回復
- PMD19-T載體連接不上428bp的片段
已經(jīng)有20人回復
- 載體總是連不上，已經(jīng)一個月了~真心求助，詳細在帖子里
已經(jīng)有7人回復
- 構建pBI121表達載體，目的基因與載體連接不上
已經(jīng)有54人回復
- 目的片段與表達載體的連接
已經(jīng)有23人回復
- T載體連接目的片段后做藍白斑全都是假陽性
已經(jīng)有6人回復
- 載體連接pcr片段一直連不上
已經(jīng)有17人回復
- 目的片段和T1載體連接后轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞涂板子總不長菌……
已經(jīng)有7人回復
- 長片段DNA如何連接載體
已經(jīng)有21人回復
- 【求助/交流】質(zhì)粒跟目的基因連接不上怎么辦
已經(jīng)有17人回復
- 【求助/交流】為什么我的PCR產(chǎn)物總是連接不上T載體
已經(jīng)有26人回復
- 【求助/交流】目的片段與載體連接不上
已經(jīng)有16人回復
淘淘279
銅蟲 (小有名氣)
- 應助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 934.8
- 帖子: 64
- 在線: 16.4小時
- 蟲號: 2670382
- 注冊: 2013-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
4樓2014-04-12 23:06:33
for5
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 127 (高中生)
- 金幣: 3356.6
- 紅花: 10
- 帖子: 880
- 在線: 283.6小時
- 蟲號: 696070
- 注冊: 2009-02-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
2樓2014-04-12 20:57:42
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 639 (博士)
- 金幣: 8720.2
- 紅花: 37
- 帖子: 1700
- 在線: 269.3小時
- 蟲號: 322365
- 注冊: 2007-03-11
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
3樓2014-04-12 22:46:37
淘淘279
銅蟲 (小有名氣)
- 應助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 934.8
- 帖子: 64
- 在線: 16.4小時
- 蟲號: 2670382
- 注冊: 2013-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
5樓2014-04-12 23:09:51
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +7 | 小材化本科 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 能源材料化學課題組招收碩士研究生8-10名 +4 | 脫穎而出 2026-03-16 | 11/550 |
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | 小材化本科 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 陌宸希 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +6 | 簡單點0 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑 +4 | Du.11 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +8 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 藥學383 求調(diào)劑 +3 | 藥學chy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070300化學學碩求調(diào)劑 +6 | 太想進步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(華東)305分求調(diào)劑 +3 | 嘉年新程 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學一志愿川大藥學327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | 李政瑩 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|