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love犬夜叉木蟲 (小有名氣)
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[求助]
T載連接后進行雙酶切結(jié)果什么都沒有了 已有2人參與
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我是做定點突變，將突變的片段連到T載上，測序驗證，用菌落PCR檢驗的時候都有目的條帶，提的質(zhì)粒也比19T的條帶要大些，就是條帶不止三條，差不多有五六條的樣子，然后雙酶切，做了幾次了，都是一跑膠檢測就是什么條帶都看不到了，泳道也沒有明顯的亮帶，的酶切體系是質(zhì)粒7μl，BamH I 0.2,Hind III o.2,10X K Buffer 1,ddH2O 1.6,時間有過夜，也有4、5個小時的，以前構(gòu)過T載，也做過雙酶切， 但是都沒有出現(xiàn)過這樣的情況，求助�。。。。。。嶒炦M度拖得太久了~~~~(>_< ~~~~ |
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