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love犬夜叉木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
T載連接后進(jìn)行雙酶切結(jié)果什么都沒(méi)有了 已有2人參與
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我是做定點(diǎn)突變，將突變的片段連到T載上，測(cè)序驗(yàn)證，用菌落PCR檢驗(yàn)的時(shí)候都有目的條帶，提的質(zhì)粒也比19T的條帶要大些，就是條帶不止三條，差不多有五六條的樣子，然后雙酶切，做了幾次了，都是一跑膠檢測(cè)就是什么條帶都看不到了，泳道也沒(méi)有明顯的亮帶，的酶切體系是質(zhì)粒7μl，BamH I 0.2,Hind III o.2,10X K Buffer 1,ddH2O 1.6,時(shí)間有過(guò)夜，也有4、5個(gè)小時(shí)的，以前構(gòu)過(guò)T載，也做過(guò)雙酶切， 但是都沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)這樣的情況，求助�。。。。。�！實(shí)驗(yàn)進(jìn)度拖得太久了~~~~(>_< ~~~~ |
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aayqaa
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3樓2014-06-27 20:00:13
love犬夜叉
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2樓2014-06-27 17:00:08
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4樓2014-06-27 20:11:50
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-07-15 20:54:21
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5樓2014-06-29 23:11:40
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