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mwangzhen新蟲 (初入文壇)
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關(guān)于方法學(xué)驗證-耐用性問題 已有4人參與
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現(xiàn)在做的一個項目，做方法學(xué)驗證-耐用性時遇到一些問題，請有經(jīng)驗的大神幫忙解答一下。 耐用性-是否：不同波長、不同流速、不同柱溫、不同柱子、不同流動相PH（涉及到的話）、不同流動相比例（涉及到的話）都要做？ 比如有關(guān)物質(zhì)方法， 流動相A：甲醇-0.02mol/L戊烷磺酸鈉的0.5%硫酸銨溶液（2M鹽酸調(diào)pH至2.00）=10:90； 流動相B：甲醇； 流速1.0ml/min，進樣量20μl，檢測波長205nm； 色譜柱 柱溫30℃ 梯度設(shè)置： 時間min 流動相A 流動相B 0 100 0 25 100 0 35 35 65 55 35 65 60 100 0 70 100 0 問題：1.我的方法不耐用，調(diào)整比例和pH后，雜質(zhì)可能分離度不好，是否必須做不同流動相PH、不同流動相比例，不做是否漏項 2.做的話，結(jié)果不好，是否可以解釋 3.如果我的樣品非常不穩(wěn)定，耐用性如果計算雜質(zhì)含量的話，做起來需要的時間比較長，是否可以有關(guān)物質(zhì)耐用性，用加主成分的混標(biāo)做各個條件，然后計算各條件下的相對保留時間和分離度（同事說見過這樣做的）？ |
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