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574759350鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR產(chǎn)物平末端化問題 已有2人參與
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| 我要做PCR產(chǎn)物和載體一個(gè)平末端一個(gè)粘性末端的連接，先將PCR產(chǎn)物用T4 DNA聚合酶削去A尾，然后再用另一個(gè)內(nèi)切酶切割，實(shí)現(xiàn)一個(gè)平端一個(gè)粘性末端，現(xiàn)在有一個(gè)問題是T4 DNA聚合酶處理平端之后還要不要膠回收再用另一個(gè)內(nèi)切酶切割，如果膠回收的話可能濃度就很低了，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中一共進(jìn)行好幾次回收，如果不回收的話又怕前一步的反應(yīng)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，大家有沒有做過的？給個(gè)建議 |
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lxj341401
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4樓2013-10-09 15:29:51
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2樓2013-08-06 11:37:54
574759350
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3樓2013-10-08 15:55:53
【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+1, 鼓勵交流 2014-03-26 09:50:55
kx444555: 金幣+1, 鼓勵交流 2014-03-26 09:50:55
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可以試試這篇論文的方法，雖然是個(gè)小的改進(jìn)，但是值得一試，而且很方便： http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256 |
5樓2014-03-25 18:58:50
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