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wei_suzhen新蟲 (小有名氣)
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[求助]
酶活測定方法
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試劑用量/μL 測定管 對照管 粗酶液 30 30 硫酸銨標準液 0 0 無氨蒸餾水 2300 2300 天門冬酰胺 200 0 混勻,置37℃水浴30min 天門冬酰胺 0 200 水楊酸溶液 1200 1200 次氯酸鈉溶液 100 100 這個的酶在國內(nèi)外沒有研究的,所以不知道怎么測酶活。酶活測定的原理是:酶和底物反應后產(chǎn)生氨,用氨與水楊酸、次氯酸鈉在堿性條件下反應生成靛酚藍,根據(jù)顏色深淺,比色定量,在650nm處測定吸光度,進而推算天門冬酰胺酶的活力。用此方法測酶活,是不是需要終止酶反應然后再加顯色劑,顯色反應30min? 或者有更好的測定方法嗎? 一般高溫終止酶反應需要多高的溫度?多長時間?如果100度,20min能使酶失活嗎? |
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