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wei_suzhen新蟲 (小有名氣)
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[求助]
酶活測(cè)定方法
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試劑用量/μL 測(cè)定管 對(duì)照管 粗酶液 30 30 硫酸銨標(biāo)準(zhǔn)液 0 0 無(wú)氨蒸餾水 2300 2300 天門冬酰胺 200 0 混勻，置37℃水浴30min 天門冬酰胺 0 200 水楊酸溶液 1200 1200 次氯酸鈉溶液 100 100 這個(gè)的酶在國(guó)內(nèi)外沒(méi)有研究的，所以不知道怎么測(cè)酶活。酶活測(cè)定的原理是：酶和底物反應(yīng)后產(chǎn)生氨，用氨與水楊酸、次氯酸鈉在堿性條件下反應(yīng)生成靛酚藍(lán)，根據(jù)顏色深淺，比色定量,在650nm處測(cè)定吸光度，進(jìn)而推算天門冬酰胺酶的活力。用此方法測(cè)酶活，是不是需要終止酶反應(yīng)然后再加顯色劑，顯色反應(yīng)30min? 或者有更好的測(cè)定方法嗎？ 一般高溫終止酶反應(yīng)需要多高的溫度？多長(zhǎng)時(shí)間？如果100度，20min能使酶失活嗎？ |
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2樓2013-09-22 13:19:19
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