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（木蟲生物專題討論）之核酸提取純化專題貼
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第一章 DNA提取與純化 主題11：土樣中DNA的提取 鏈接：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=156607&fpage=271 解答1：annpc5 附件1：DNA recovery from soils of diverse composition 附件2：直接從土壤中提取DNA得方法 主題12：提取DNA時(shí)，PVP聚乙烯基吡咯烷酮的作用? 鏈接：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=479437&fpage=258 解答1：發(fā)如雪 聚乙烯吡咯烷酮 分子式：(C6H9NO)n 一、性質(zhì)： 粉末或水溶液，易溶于水及多種有機(jī)溶劑，具有良好溶解性，生物相溶性，生理惰性，成膜性，膠體保護(hù)能力和與多種有機(jī)、無(wú)機(jī)化合物復(fù)合的能力，對(duì)酸、鹽及熱較穩(wěn)定。 二、用途： 在化妝品工業(yè)中作為分散劑、成膜劑、增稠劑、潤(rùn)滑劑及粘合劑，在醫(yī)藥工業(yè)中是藥用合成新輔料之一，可用作片劑、顆粒的粘結(jié)劑、緩釋劑。注射劑的助劑和穩(wěn)定劑、膠囊的助流劑，液體制劑及著色劑的分散劑，酶及熱敏藥物的穩(wěn)定劑，難溶藥物的共沉淀劑，眼藥的延效劑及潤(rùn)滑劑和包衣成膜劑等；在涂料、顏料、塑料樹脂、玻璃纖維、油墨、粘合劑、凈洗劑、攝影膠卷、壓片、電視顯像管、生產(chǎn)藥水、膠布、消毒劑、紙張、紡織印染等方面用 作助劑。 解答2：anlewo7777 PVP可與多種物質(zhì)，特別是含羥基、羧基、氨基及其他含活性氫的化合物或單質(zhì)形成絡(luò)合物，例如，它可與許多毒素、病毒、醫(yī)藥及毒性化學(xué)品形成絡(luò)合物，以減少其毒性和刺激性。 與少數(shù)幾種物質(zhì)（如多元酚）的絡(luò)合力很強(qiáng)，在中性及酸性物質(zhì)中，形成沉淀。這種特性可從溶液和飲料中除去多元酚和花色素氰。但使用不溶性 PVP效果更好。 解答3：分子進(jìn)化 主要是除多酚類物質(zhì) 主題13：桃的DNA提取（果凍樣沉淀） 鏈接：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=488559&fpage=253 解答1：lyl0807 加NaAc試試 解答2：tiny20022005 先用無(wú)CTAB的緩沖液洗滌勻漿能較好去除多糖 解答3：randomqd 把離心的速度調(diào)高些 解答4：hallhowe 離心后去掉異丙醇，再加入乙醇沉淀，再離心。離心要高速，4度 解答5：Doublel 雜質(zhì)應(yīng)該是樹膠類物質(zhì)，桃的果實(shí)中含量很多的。 主題14：請(qǐng)問怎樣去除DNA提取產(chǎn)物中的色素等物質(zhì)？ 鏈接：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=499180&fpage=250 解答1：cdl007 你提的是DNA，可以用玻璃棒挑出來(lái)再溶到另一個(gè)管里 多漂洗幾次，應(yīng)該能去掉很多雜質(zhì) 這個(gè)方法最簡(jiǎn)單而且不用引入新的污染 還可以采用非可溶性PVP（polyvinylpyrrolidone）研磨樣品， PVP能絡(luò)合多酚類物質(zhì)，不但能較徹底防止氧化作用，而且能有效的去除多糖和色素，色素是PCR反應(yīng)中的強(qiáng)抑制劑，一定要除掉 主題15：提取一種微型動(dòng)物DNA 鏈接：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=538532&fpage=223 解答1：xiaopu_yin 估計(jì)一些常規(guī)的方法你都試過，有沒有想過在溶液中加幾丁質(zhì)酶，消化一部分蟲體壁？ 解答2：glucidum 如果LZ只是需要提取一點(diǎn)點(diǎn)DNA 來(lái)做PCR,進(jìn)行系統(tǒng)分析的話.建議試試在解剖鏡下直接用鑷子碾碎蟲體然后加入蛋白酶消化處理。消化處理的溶液即可直接用做PCR,不需要再做沉淀處理等等。 解答3：陳碩真 超聲破碎或高速球磨等機(jī)械方法肯定能夠破碎，用研磨也可以 解答4：dajiahaoma Evaluation of extraction methods for the isolation of dust mites 7種提取方法 （附件下載） |
8樓2008-08-15 17:25:41
I．技巧篇
2樓2008-08-15 17:13:35
3樓2008-08-15 17:15:07
4樓2008-08-15 17:17:49
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