 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1881 | 回復(fù): 9 | ||
yuyang031985金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
[求助]
請(qǐng)教Western blot問(wèn)題 已有1人參與
|
|
最近在做Western blot，提取耐藥細(xì)胞的p-gp蛋白，文獻(xiàn)報(bào)道理論分子量170kd，我們跑出來(lái)的分子量130kd左右，而且還不確定是不是該條帶，請(qǐng)高人指點(diǎn)哪里有可能出問(wèn)題？？ 已使用過(guò)的抗體：Abcam的p-gp抗體（兔抗、鼠抗都用過(guò)）；博士德的p-gp抗體 膠的濃度：6%、8%、10%和12%都使用過(guò)； 裂解液：碧云天的強(qiáng)、中強(qiáng)、弱的裂解液都試過(guò)； 提蛋白的方法：總蛋白和膜蛋白的提取都嘗試過(guò)； 使用的膜：0.22微米的PVDF膜 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有87人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- western blot伯樂(lè)電泳儀的問(wèn)題請(qǐng)教！謝謝大家！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 10kd 和100kd的蛋白同時(shí)做western blot
已經(jīng)有11人回復(fù)
- western blot 條帶
已經(jīng)有15人回復(fù)
- western blot 半干式電轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)不上問(wèn)題��！快來(lái)幫幫忙啊��！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 關(guān)于western blot SDS電泳時(shí)溴芬蘭線彌散的問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 14kd的蛋白，做westernblot，電轉(zhuǎn)條件是怎樣的
已經(jīng)有11人回復(fù)
- Western Blot出現(xiàn)問(wèn)題
已經(jīng)有19人回復(fù)
- western blot 第一次曝光有條帶，而且濃厚，第二次就沒(méi)有了。。。
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 求助，Western-Blot轉(zhuǎn)膜不成功
已經(jīng)有22人回復(fù)
- western blot中蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印問(wèn)題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- Western Blot實(shí)驗(yàn)的蛋白條帶都連在一起
已經(jīng)有37人回復(fù)
- 請(qǐng)教western blot 時(shí)蛋白稀釋液情況
已經(jīng)有4人回復(fù)
- western blot 請(qǐng)教
已經(jīng)有10人回復(fù)
- western blot 求助，請(qǐng)高手指點(diǎn)一下
已經(jīng)有8人回復(fù)
- Western-blot 膜封閉時(shí)間？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- Western blot中出現(xiàn)的問(wèn)題-求高手指點(diǎn)
已經(jīng)有17人回復(fù)
- Western Blot電泳蛋白質(zhì)外漏問(wèn)題求助
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助】western blot 濕轉(zhuǎn) 緩沖液 甲醇作用
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】westernblot
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】western blot 缺帶 斷帶
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 【求助/交流】純化酶切后的膜蛋白做Western blot沒(méi)條帶，why？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】western blot 一直都跑不出來(lái)，不知道原因，大俠給分析一下�。�？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教Western blot出現(xiàn)非特異性條帶的怎么解決
已經(jīng)有8人回復(fù)
- Western Blot 磷酸化蛋白測(cè)定問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
hongyongbo
銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1497.8
- 散金: 415
- 紅花: 4
- 帖子: 379
- 在線: 242.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1194335
- 注冊(cè): 2011-01-22
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物病理學(xué)
2樓2013-08-07 21:08:26
hongyongbo
銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1497.8
- 散金: 415
- 紅花: 4
- 帖子: 379
- 在線: 242.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1194335
- 注冊(cè): 2011-01-22
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物病理學(xué)
3樓2013-08-07 21:09:04
biowandy
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 4752.3
- 散金: 689
- 紅花: 4
- 帖子: 627
- 在線: 157.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 382870
- 注冊(cè): 2007-05-25
- 專(zhuān)業(yè): 免疫學(xué)研究新技術(shù)與新方法
4樓2013-08-07 21:59:09
jiang701820
銀蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 587.3
- 散金: 15
- 帖子: 98
- 在線: 113.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1943252
- 注冊(cè): 2012-08-17
- 專(zhuān)業(yè): 心臟結(jié)構(gòu)與功能異常
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 改蛋白是否還有其他修飾，我之前也有過(guò)這樣的經(jīng)歷，文獻(xiàn)報(bào)道在120kDa，但是我做出來(lái)始終在56kDa，而且我買(mǎi)的抗體說(shuō)明書(shū)上也是寫(xiě)的56kDa，這些抗體做出來(lái)再120kDa也沒(méi)有條帶，后來(lái)查了文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)這個(gè)蛋白存在糖基化，糖基化后分子量會(huì)達(dá)到120kDa，所以你可以查一下你現(xiàn)在這個(gè)蛋白的氨基酸序列，算一下大概有多少Kda，如果說(shuō)氨基酸序列算出來(lái)有170kDa的話，那可能你的實(shí)驗(yàn)確實(shí)存在一定問(wèn)題，考慮換其他公司的抗體，另外建議用0.45uM的PVDF膜，因?yàn)樵摰鞍椎姆肿恿勘容^大。如果氨基酸序列算出來(lái)的分子量在130kDa左右的話可能是該蛋白存在其他修飾。 |
5樓2013-08-07 22:09:32
yuyang031985
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1020.1
- 散金: 22
- 紅花: 3
- 帖子: 372
- 在線: 166.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 328822
- 注冊(cè): 2007-03-22
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問(wèn)題
6樓2013-08-08 17:05:17
yuyang031985
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1020.1
- 散金: 22
- 紅花: 3
- 帖子: 372
- 在線: 166.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 328822
- 注冊(cè): 2007-03-22
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問(wèn)題
7樓2013-08-08 17:05:42
yuyang031985
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1020.1
- 散金: 22
- 紅花: 3
- 帖子: 372
- 在線: 166.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 328822
- 注冊(cè): 2007-03-22
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問(wèn)題
8樓2013-08-08 17:07:57
9樓2014-02-24 14:40:06
jiaolong11a
新蟲(chóng) (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 46 (小學(xué)生)
- 金幣: 487.3
- 紅花: 5
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 227
- 在線: 29.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1244690
- 注冊(cè): 2011-03-25
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
10樓2014-02-24 14:56:29
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 yuyang031985 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 陽(yáng)陽(yáng)哇塞 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名 +4 | 脫穎而出 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 陌宸希 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 總分331 +3 | ZY-05 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專(zhuān)碩調(diào)劑 +5 | heming3743 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854控制工程 359求調(diào)劑 可跨專(zhuān)業(yè) +3 | 626776879 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 求調(diào)劑 +13 | enenenhui 2026-03-13 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學(xué)調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對(duì)?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料301分求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過(guò) 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專(zhuān)碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 152697 2026-03-12 | 4/200 |
|