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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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yuyang031985

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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專(zhuān)業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問(wèn)題

[求助] 請(qǐng)教Western blot問(wèn)題已有1人參與

最近在做Western blot，提取耐藥細(xì)胞的p-gp蛋白，文獻(xiàn)報(bào)道理論分子量170kd，我們跑出來(lái)的分子量130kd左右，而且還不確定是不是該條帶，請(qǐng)高人指點(diǎn)哪里有可能出問(wèn)題？？

已使用過(guò)的抗體：Abcam的p-gp抗體（兔抗、鼠抗都用過(guò)）；博士德的p-gp抗體
膠的濃度：6%、8%、10%和12%都使用過(guò)；
裂解液：碧云天的強(qiáng)、中強(qiáng)、弱的裂解液都試過(guò)；
提蛋白的方法：總蛋白和膜蛋白的提取都嘗試過(guò)；
使用的膜：0.22微米的PVDF膜

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說(shuō)說(shuō)你不開(kāi)心的事讓我們開(kāi)心一下哈！

1樓 2013-08-07 16:33:57

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酷哥哥1990

金蟲(chóng) (小有名氣)

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我也是做耐藥細(xì)胞中P-糖蛋白表達(dá)的，也遇到了和你一樣的問(wèn)題。。。。請(qǐng)問(wèn)你這個(gè)問(wèn)題解決了嗎？還有就是膜蛋白你是怎么提取的？

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9樓2014-02-24 14:40:06

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hongyongbo

銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

該蛋白是否有亞基，在提取純化過(guò)程中降解導(dǎo)致少了40KD

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2樓2013-08-07 21:08:26

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hongyongbo

銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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【答案】應(yīng)助回帖

還要考慮下可變剪切

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3樓2013-08-07 21:09:04

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biowandy

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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專(zhuān)業(yè): 免疫學(xué)研究新技術(shù)與新方法

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

請(qǐng)問(wèn)具體蛋白是什么名字？可以上uniprot研究下蛋白特性，

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4樓2013-08-07 21:59:09

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普通表情龍兔虎貓

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