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spirit_free金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PBI121 與目的片段連接后轉入DH5α,長出的菌落提取質粒都是空載,求原因 已有3人參與
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| 我是將PBI121載體與目的片段分別雙酶切后電泳,切膠回收,再做連接的。PBI121雙酶切是切去GUS基因(約1.8kb),要連接的目的片段是113bp,用連接后的產物轉化DH5α,挑取得到的菌落,搖菌提質粒,得到的質粒是含有GUS基因的PBI121,而不是我預期的到的pbi121與目的片段的連接產物。求各位幫忙分析原因。另外求教怎樣提高PBI121與目標片段的連接成功率,是不是我的目標片段太小了因此與PBI121連接比較困難。 |
銀蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)


新蟲 (初入文壇)
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