 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4306 | 回復(fù): 5 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
spirit_free金蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
PBI121 與目的片段連接后轉(zhuǎn)入DH5α，長(zhǎng)出的菌落提取質(zhì)粒都是空載，求原因 已有3人參與
|
||
| 我是將PBI121載體與目的片段分別雙酶切后電泳，切膠回收，再做連接的。PBI121雙酶切是切去GUS基因（約1.8kb），要連接的目的片段是113bp，用連接后的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α，挑取得到的菌落，搖菌提質(zhì)粒，得到的質(zhì)粒是含有GUS基因的PBI121，而不是我預(yù)期的到的pbi121與目的片段的連接產(chǎn)物。求各位幫忙分析原因。另外求教怎樣提高PBI121與目標(biāo)片段的連接成功率，是不是我的目標(biāo)片段太小了因此與PBI121連接比較困難。 |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
風(fēng)隨心動(dòng)» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有257人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- DH5α轉(zhuǎn)化后 提取質(zhì)粒提取不出來(lái)
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 關(guān)于目的基因與載體連接后轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞提取質(zhì)粒的問(wèn)題。
已經(jīng)有8人回復(fù)
- PBI121載體與目的片段連接后雙酶切問(wèn)題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 酶切連接連不上，要死了
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 求幫助！基因連接克隆載體后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，兩天了都沒(méi)長(zhǎng)出菌。。。
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 大腸桿菌培養(yǎng) 質(zhì)粒提取后困惑
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 目的片段和載體連接一直不上
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 兩個(gè)質(zhì)粒同時(shí)轉(zhuǎn)大腸DH5α
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒構(gòu)建 連接轉(zhuǎn)化效率低 求幫助啊
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 糾結(jié)的分子實(shí)驗(yàn)，雙酶切連不上，求助
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)化感受態(tài)后提取質(zhì)粒，測(cè)濃度總是很低
已經(jīng)有17人回復(fù)
- pET28a雙酶切后連接目的基因，什么也不長(zhǎng)。。。
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 質(zhì)�？斐橛袟l帶，提取時(shí)卻沒(méi)有了，什么問(wèn)題��？
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 目的片段和pMD18-T simple vector 的連接
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 求助！大腸桿菌轉(zhuǎn)化不長(zhǎng)菌落~
已經(jīng)有28人回復(fù)
- 目的片段與載體連接后無(wú)法檢測(cè)出
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 載體連接pcr片段一直連不上
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 克隆基因和載體連接后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌，為什么每次涂板都是空平板沒(méi)有菌落？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化后菌落PCR正確，提取的質(zhì)粒卻比空質(zhì)粒還小？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因連接表達(dá)載體后涂板不長(zhǎng)菌
已經(jīng)有11人回復(fù)
董博士
金蟲(chóng) (正式寫手)
- 應(yīng)助: 155 (高中生)
- 金幣: 3129.9
- 紅花: 24
- 帖子: 312
- 在線: 96.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3524307
- 注冊(cè): 2014-11-07
- 專業(yè): 醫(yī)學(xué)圖像數(shù)據(jù)處理與分析
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-02-01 14:56:35
spirit_free: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-02-02 00:11:59
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-02-01 14:56:35
spirit_free: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-02-02 00:11:59
| 構(gòu)建重組質(zhì)粒做轉(zhuǎn)化時(shí)最好加對(duì)照，除了連接產(chǎn)物之外，用你酶切后的載體轉(zhuǎn)化做對(duì)照，你酶切后的載體這個(gè)板是不是有菌落，如果有可以確定是你酶切的問(wèn)題，如果沒(méi)有，你再調(diào)整下你的載體和目的基因的比例 |
3樓2015-02-01 11:00:29
ptttmt
銀蟲(chóng) (正式寫手)
- 應(yīng)助: 85 (初中生)
- 金幣: 1216.4
- 紅花: 12
- 帖子: 519
- 在線: 192.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3621717
- 注冊(cè): 2014-12-31
- 專業(yè): 病毒學(xué)
2樓2015-01-30 17:23:31
4樓2015-02-01 23:59:15
風(fēng)隨心動(dòng)
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 577.4
- 散金: 112
- 紅花: 3
- 帖子: 152
- 在線: 427.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2322809
- 注冊(cè): 2013-03-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因組學(xué)
5樓2015-10-20 12:38:30
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動(dòng)285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-28 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +8 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | Micky11223 2026-03-25 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +7 | 麻辣魷魚(yú) 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程求調(diào)劑 +9 | 多久上課 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +4 | 愛(ài)吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +9 | 上岸吧ZJY 2026-03-22 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +4 | 王了個(gè)楠 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +4 | 贈(zèng)我一本書(shū) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 1() 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +6 | 田洪有 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物技術(shù)與工程 +3 | 1294608413 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | 汪！？！ 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +7 | α____ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-24 | 3/150 |
|