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spirit_free金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PBI121 與目的片段連接后轉(zhuǎn)入DH5α，長出的菌落提取質(zhì)粒都是空載，求原因 已有3人參與
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| 我是將PBI121載體與目的片段分別雙酶切后電泳，切膠回收，再做連接的。PBI121雙酶切是切去GUS基因（約1.8kb），要連接的目的片段是113bp，用連接后的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α，挑取得到的菌落，搖菌提質(zhì)粒，得到的質(zhì)粒是含有GUS基因的PBI121，而不是我預(yù)期的到的pbi121與目的片段的連接產(chǎn)物。求各位幫忙分析原因。另外求教怎樣提高PBI121與目標(biāo)片段的連接成功率，是不是我的目標(biāo)片段太小了因此與PBI121連接比較困難。 |
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風(fēng)隨心動
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5樓2015-10-20 12:38:30
ptttmt
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2樓2015-01-30 17:23:31
董博士
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spirit_free: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-02-02 00:11:59
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3樓2015-02-01 11:00:29
4樓2015-02-01 23:59:15
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